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食品級(jí) 西安達(dá)爾聞 著色劑 紅曲黃 CAS50980-32-0

分離純化

1、黃色素粗提液的制備

收集搖瓶發(fā)酵液菌體，烘干后研磨成粉末。采用70%乙醇溶劑超聲提取紅曲色素，提取液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中50℃、100 MPa條件下真空濃縮去除乙醇溶劑，旋蒸后的濃縮液進(jìn)行預(yù)凍處理，最后置于冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥成粉末。稱取2 g紅曲色素粉末溶于10 mL正己烷溶劑，于超聲中50℃提取1 h，過(guò)濾除去粉末殘余雜質(zhì)得黃色素混合粗提液。

2、柱層析的預(yù)處理

硅膠的預(yù)處理：稱取14 g硅膠于110℃活化1 h后放入干燥的燒杯中冷卻，加適量的溶劑溶解并浸泡30 min（浸泡硅膠的溶劑與洗脫黃色組分的溶劑相同）。

硅膠裝柱：清洗干凈玻璃層析柱，干燥后，濕法裝柱，本實(shí)驗(yàn)層析柱規(guī)格（ψ20 mm×200 mm）。將層析柱垂直固定在鐵架臺(tái)上，將浸泡好的硅膠連同溶劑均勻倒入層析柱內(nèi)。待柱子上端的懸浮液慢慢下降到需要的高度，鋪一層海砂防止加樣與洗脫時(shí)擾動(dòng)柱表面，最后用洗脫劑平衡2個(gè)柱體積。

上樣：平衡柱子后，待平衡液的彎月面正好與硅膠床面持平時(shí)，將用洗脫溶劑提取后的紅曲黃色素粗提液加到柱表面，操作時(shí)要小心謹(jǐn)慎以免擾動(dòng)柱表面。

樣品的洗脫：洗脫紅曲黃色素選用正己烷、石油醚、乙酸乙酯三種常用低極性溶劑，按一定體積配比混合后作為洗脫劑，收集黃色組分，經(jīng)一系列操作后濃縮干燥得紅曲黃色素。