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生產方法由蘇氨酸含量高的天然蛋白質(絲膠蛋白、酪蛋白、絲心蛋白等)經水解，用離子交換樹脂分離精制而得。由甘氨酸銅與乙醛反應制取DL-蘇氨酸(參見“DL-蘇氨酸”)，在所得DL-蘇氨酸溶液內接種L-型晶體，使僅對L-進行旋光拆開而得L-氨酸。生產方法方法一、直接發酵法以葡萄糖為原料，選育營養缺陷型兼結構類似物合成中的反饋抑制與阻遏，達到L-蘇氨酸產酸率為18g/L,谷氨酸棒狀桿菌，產酸率為14g/L,黏質賽桿菌率14g/L。葡萄糖[黃色短桿菌、谷氨酸Chemicalbook棒桿菌、黏質賽桿菌等]→L-蘇氨酸方法二、化學合成法因化學合成所得的蘇氨酸為4種光學異構體的混合物，即DL-蘇氨酸。

L-蘇氨酸的工業生產方法主要有：①合成法；②發酵法；③蛋白質水解法三種。現提倡用發酵法生產。

方法一、直接發酵法：

1.發酵法是以糖、氨、高絲氨酸（homoserine）為培養基，用產谷氨酸小球菌（glutaminus）等發酵后精制可制得L-蘇氨酸。

以葡萄糖為原料，選育營養缺陷型兼結構類似物合成中的反饋抑制與阻遏，達到L-蘇氨酸產酸率為18g/L，谷氨酸棒狀桿菌，產酸率為14g/L，黏質賽桿菌率14g/L。

葡萄糖[黃色短桿菌、谷氨酸棒桿菌、黏質賽桿菌等]→L-蘇氨酸。